Инъекции мРНК изменяют генетику человека способами, которые связаны с раком и аутоиммунными заболеваниями. Такие громкие выводы следуют из итогов недавнего немецкого исследования.
Команда Симонс и соавторы
Статья, озаглавленная „Стойкая эпигенетическая память о вакцинации мРНК SARS-CoV-2 в моноцитарных макрофагах”, находится на рассмотрении и была опубликована на прошлой неделе.
Исследование имело целью объяснить, как происходят „воспалительные заболевания, которые возникают у небольшого числа вакцинированных людей“, — пишут исследователи.
Вот, что они указали во введении:
До сих пор неизвестно, как именно мРНК-вакцины обучают клетки врождённого иммунитета формировать защитные механизмы организма. Здесь мы показываем, что вакцинация мРНК-вакциной SARS-CoV-2 значительно усиливает ацетилирование лизина 27 гистона H3 (H3K27ac) в промоторах макрофагов, полученных из моноцитов человека, что указывает на эпигенетическую память.
Однако мы обнаружили, что для сохранения H3K27ac требуются две последовательные вакцинации, которые сопровождаются провоспалительными изменениями в транскрипции, связанными с врождённым иммунитетом, и секрецией цитокинов, опосредованной антигенами. H3K27ac в промоторных областях сохранялся в течение шести месяцев, и одна бустерная доза мРНК-вакцины эффективно восстанавливала его уровень и высвобождение цитокинов, вырабатываемых макрофагами.
Интересно, что мы обнаружили, что H3K27ac в промоторах обогащён последовательностями, формирующими вторичную структуру G-квадруплекса ДНК в областях, обедненных нуклеосомами, полученными из макрофагов, что связывает эпигенетическую память со структурой нуклеиновых кислот. В совокупности эти результаты показывают, что мРНК-вакцины вызывают очень динамичную и устойчивую активацию клеток врождённого иммунитета, что обеспечивает устойчивый провоспалительный иммунный ответ.
Целью исследования было изучение иммунной памяти после обработки мРНК. Изучались изменения в хромосомах макрофагов [иммунных клеток] у людей, получивших инъекции мРНК Covid.
Эти иммунные клетки циркулируют в крови и атакуют чужеродные вирусы или бактерии. Ученые обнаружили изменения в важной части хромосомы макрофагов, называемой гистоном.
Но с этим открытием можно похвалить лечение мРНК. С его помощью можно было бы показать, что вакцинация мРНК предназначена для защиты в течение шести месяцев. После этого бустер быстро возвращает соответствующие иммунные клетки обратно. Приведенная выше фраза лишь вскользь обсуждается в обсуждении статьи,не делая долгосрочных выводов на перспективу.
Что такое гистоны
В отличие от самой ДНК, гистоны не содержат фактической генетической информации, а скорее придают ей структуру. Часто ее называют барабаном, вокруг которого наматывается ДНК.
Гистоны играют решающую роль в обработке генетического материала. Когда они расположены близко друг к другу, содержащаяся в них ДНК становится труднодоступной, так что клеточный механизм, который использует ДНК для производства белков, не может этого сделать.
Если гистоны расположены дальше друг от друга, клетки могут более активно обрабатывать или транскрибировать ДНК, что может привести к росту опухоли.
В ходе обсуждения с внешними рецензентами, опубликованного вместе с работой, исследователи указали, что обнаруженные ими изменения „с большой вероятностью“ происходят в клетках костного мозга, источника всех клеток крови.
В предыдущих исследованиях мы смогли продемонстрировать, что вакцинация мРНК-вакциной против SARS-CoV-2 и заражение SARS-CoV-2 могут приводить к значительным изменениям в моноцитах и макрофагах, полученных из моноцитов, которые сохраняются дольше, чем обычно (Теобальд и др., 2021; Теобальд и др., 2022).
Эти фенотипические исследования в основном основывались на рестимуляции макрофагов аффинно-очищенным шиповидным белком (SP) SARS-CoV-2 ex vivo. Чтобы подробно изучить, вызывает ли вакцинация мРНК-вакциной SARS-CoV-2 всестороннее и неспецифическое перепрограммирование макрофагов, полученных из моноцитов, что является ключевой характеристикой врождённой иммунной памяти, мы провели обширные исследования рестимуляции с использованием различных PAMP и молекулярных паттернов, ассоциированных с опасностью (DAMP), нацеленных на несколько рецепторов распознавания паттернов (рис. 1A,B).
Используя данные нашей большой когорты людей, вакцинированных мРНК-вакциной против SARS-CoV-2, мы сначала оценили уровень секреции IL-1β в макрофагах, инкубированных с одноцепочечной РНК (оцРНК) (агонистом Toll-подобного рецептора (TLR) 7 и TLR8), зимозаном (агонистом TLR2 и Dectin-1) и Pam3CSK4 (агонистом TLR2/TLR1) (набор данных EV1). Стимулируя макрофаги, полученные из моноцитов вакцинированных людей, до вакцинации (t0), через 2 недели после первой (t1) и второй (t2) вакцинации, а также через 10 недель после второй вакцинации (t3), мы наблюдали увеличение секреции IL-1β по сравнению с t0 (рис. 1C–E).
Следует отметить, что для всех использованных лигандов рецепторов статистически значимые уровни IL-1β наблюдались только через 2 недели после второй вакцинации (t2), что указывает на необходимость первичной и бустерной вакцинации для существенной активации и перепрограммирования макрофагов. Для клеток, стимулированных одноцепочечной РНК, реактивность сохранялась до 10 недель после второй вакцинации (рис. 1C).
Наконец, чтобы продемонстрировать важную роль главного регуляторного ядерного фактора «каппа-легкой цепи-энхансер» активированных В-клеток (NF—κB) в секреции цитокинов стимулированными макрофагами, мы обработали макрофаги t2 KINK-1 (ингибитором киназы NF—κB) и измерили количество IL-1β в клеточных супернатантах. В качестве контрольного вещества мы использовали селективный ингибитор инфламмасомы NLRP3 MCC950. Оба ингибитора значительно снижали секрецию IL-1β в ответ на воздействие всех трёх агонистов рецепторов (рис. EV1F–H).
В совокупности эти результаты подтверждают, что вакцинация мРНК-вакциной SARS-CoV-2 повышает чувствительность макрофагов, активированных in vivo, к различным иммунологическим триггерам, что опосредуется сигнальными путями NF—κB и инфламмасомы. В нашей группе для высвобождения значительного количества цитокинов в стимулированных клетках требовались две вакцинации, что позволяет предположить, что первая вакцина вызывает реакцию памяти в макрофагах, полученных из моноцитов.
Заинтересовавшись нашим наблюдением, что мРНК-вакцинация против SARS-CoV-2 в целом усиливает цитокиновый ответ на различные PAMP, мы провели анализ секвенирования РНК стимулированных и нестимулированных макрофагов, полученных из моноцитов, в моменты времени t0 и t2, чтобы всесторонне оценить влияние вакцинации на уровне транскрипции всего генома.
Здесь мы наблюдали существенные различия в паттернах экспрессии генов между разными группами. Стимуляция SP-белком макрофагов, полученных из моноцитов непривитых людей (t0), вызывала лишь умеренные изменения в уровнях экспрессии генов по сравнению с нестимулированными клетками t0 (рис. 2A; набор данных EV2). Напротив, стимуляция SP-белком клеток, выделенных в t2, привела к значительному изменению транскриптома, что указывает на влияние вакцинации на последующую экспрессию генов при стимуляции SP-белком (рис. 2B; набор данных EV3).
При сравнении транскриптома стимулированных SP клеток обеих групп (непривитых и привитых) можно было чётко различить две группы по профилям экспрессии генов (рис. 2C). Анализ экспрессии генов в макрофагах после стимуляции SP по сравнению с нестимулированными клетками выявил 2519 генов (!!), которые были дифференциально экспрессированы (определяется как изменение в логарифме 2-го порядка ±1 и скорректированное значение P < 0,05) исключительно в макрофагах, полученных от вакцинированных людей. Кроме того, 268 дифференциально экспрессированных генов (ДЭГ) были общими для обеих групп, и только 50 ДЭГ были специфичны для макрофагов, полученных от непривитых людей (рис. 2D).
Кроме того, анализ экспрессии генов выявил сильную активацию генов, связанных с врождённым иммунным ответом, передачей сигналов цитокинов и защитной реакцией на вирусы в макрофагах вакцинированных людей, стимулированных SP в момент t2, по сравнению с невакцинированными людьми (рис. 2E,F; наборы данных EV4 и EV5).
Эти наблюдения подтверждают гипотезу о том, что вакцинация мРНК-вакцинами вызывает эффект праймирования, повышая транскрипционную реактивность при воздействии патогенных стимулов ex vivo.
Наконец, чтобы также фенотипически подтвердить наличие стойкой иммунной памяти в макрофагах, мы измерили секрецию IL-1β в t4 и t5 в ответ на PAMP. Как и ожидалось, мы обнаружили значительно более высокие уровни IL-1β в супернатантах макрофагов, выращенных в t5, по сравнению с макрофагами, выращенными в t4, что указывает на связь между повышенной секрецией цитокинов, уровнями H3K27ac и усиленной иммунной реакцией (рис. 5D).
Примечательно, что высвобождение IL-1β было значительно выше в момент t5 по сравнению с моментом t4, чем в момент t1 по сравнению с моментом t0 (стимуляция зимозаном: среднее изменение в 16,38 раза [t5/t4] по сравнению с 1,63 [t1/t0]; стимуляция Pam3CSK4: среднее изменение в 66,90 раза [t5/t4] по сравнению с 0,92 [t1/t0]), что снова указывает на эффект памяти, сохраняющийся в течение нескольких месяцев (рис. EV4). Меньшее влияние стимуляции одноцепочечной РНК на секрецию IL-1β (среднее кратное изменение 2,59 [t5/t4] по сравнению с 6,28 [t1/t0]) может быть объяснено устойчивой долгосрочной реакцией на одноцепочечную РНК после двух вакцинаций (t3), которая не наблюдалась в такой степени для зимозана или Pam3CSK4 (рис. 5D).
Таким образом, мы продемонстрировали, что вакцинация от SARS-CoV-2 вызывает долгосрочные эпигенетические модификации H3K27ac в промоторных областях, что приводит к усилению экспрессии генов и врождённых иммунных реакций на несвязанные с вирусом PAMP в макрофагах, тем самым предполагая индукцию тренированного врождённого иммунитета.
Значение данного исследования и выводы, которые не были сделаны
Это открытие появилось в то время, когда другие исследователи сообщают о растущем числе смертей от лейкемии – рака крови – в Японии, например, где очень много вакцинированных.
В статье Кельна исследователи не указали, что мРНК-управляемые изменения гистонов могут происходить и в еще более важной части иммунной системы – стволовых клетках костного мозга, которые продуцируют моноциты и все другие клетки крови.
Конкретное изменение, обнаруженное исследователями Кельнского университета, называется „ацетилированием гистона 3 лизина 27“, сокращенно H3K27ac.
Известно, что изменение H3K27ac встречается при различных типах рака и является предметом научных дискуссий.
Алекс Беренсон указывает на недавний китайский обзор, посвященный генетическим мутациям и эпигенетическим механизмам, с помощью которых H3K27ac может способствовать развитию различных видов рака.
„Генетические мутации и эпигенетические механизмы, с помощью которых H3K27ac может способствовать развитию различных видов рака… [и] будущие направления лечения рака, которые могут включать атаку на H3K27ac“. Осенью польские исследователи представили аналогичный обзор: „Ацетилирование гистонов … регулирует экспрессию генов [и] связано с развитием, развитием и прогрессированием рака“, — написали они.
Ацетилирование гистонов, в частности ацетилирование H3 K27 (H3K27ac), является важной посттрансляционной модификацией, которая регулирует структуру хроматина и экспрессию генов и играет значительную роль в развитии различных видов рака, включая рак молочной железы, толстой кишки, лёгких, печени и простаты.
Однако механизмы участия H3K27ac в онкогенезе до сих пор до конца не изучены, особенно его эпигенетические механизмы. В этом обзоре мы попытаемся обсудить результаты исследований участия H3K27ac в канцерогенезе за последние 5 лет, проведя поиск литературы в таких академических базах данных, как Web of Science. Во-первых, мы представим обзор различных модификаций гистонов, подчеркнув отличительные особенности и критическое значение H3K27ac.
Во-вторых, мы обобщаем и сравниваем передовые технологии высокопроизводительного секвенирования, которые были использованы при построении эпигенетической карты H3K27ac. В-третьих, мы выясняем роль H3K27ac в регуляции транскрипции генов. В-четвёртых, мы рассматриваем потенциальный молекулярный механизм H3K27ac в развитии рака.
Наконец, мы обсуждаем будущие терапевтические подходы в онкологии, уделяя особое внимание стратегиям, использующим потенциал модификаций H3K27. В заключение, в этом обзоре подробно описываются характеристики H3K27ac и подчёркивается его ключевая роль в развитии рака, что даёт ценную информацию о его потенциале в качестве терапевтической мишени для лечения рака.
В частности, в этом исследовании отмечалось, что изменение H3K27ac было обнаружено при лейкозе и других типах рака, включая глиому, смертельную форму рака головного мозга.
Кельнское издание отмечает, что изменения H3K27ac происходят во многих хромосомных областях. Кроме того, они обнаружили изменения в макрофагах через несколько месяцев после вакцинации. Это особенно интересно, потому что макрофаги обычно отмирают через одну-две недели:
„Мы смогли продемонстрировать, что вакцинация мРНК SARS-CoV-2 вызывает обширные и стойкие изменения H3K27ac в промоторах [определенной области хромосомы, которая способствует транскрипции ДНК] короткоживущих макрофагов“.
В документе это продолжающееся изменение интерпретируется как свидетельство долгосрочного эффекта лечения мРНК против Covid-19.
Риски, в том числе связанные с раком, не обсуждаются. Почему?
Однако в ходе обсуждения с рецензентом, который попросил их „привести примеры перепрограммирования HSC [стволовых клеток] в костном мозге и объяснить, как это может объяснить долгосрочные [изменения]“, они ответили, что, по их мнению,
„весьма вероятно“, что мРНК-вакцины будут иметь тот же вид, что и мРНК-вакцины, вызывая изменения в стволовых клетках, подобные тем, которые вы обнаружили в макрофагах.
Почему немецкие исследователи не упомянули об этой возможности в своей статье, неясно. Запрос Беренсона остался без ответа.
Но вы можете сделать выводы самостоятельно.
Источники:
