Исследование, с которым боролись в течение многих лет, наконец-то было опубликовано в апреле 2025 года. В исследовании изучались люди с так называемым «постпрививочным синдромом» или то, что называется как раз «после значит вследствие».
Результаты впечатляющие, интересно то, что авторы описывают о своей жизни и работе в процессе допуска данной работы в публичный доступ.
Исследователи изучали людей с „пост-вакантным синдромом“. Вместо рецензирования их „клеветали, оскорбляли и угрожали смертью“. Но теперь статья стала общедоступной.
Что говорят авторы о процессе своей работы
Один из ученых описывает, что он испытал во время исследования:
„Нашей статье о синдроме вакцинации после COVID (PCVS) потребовалось четыре года, чтобы пройти рецензирование и публикацию. Еще в 2021 году мы знали, что некоторые люди страдают от долгосрочных последствий прививок от COVID, и пытались забить тревогу.
Вместо этого нас заставляли замолчать, клеветали, оскорбляли и угрожали смертью. Спасибо всем, кто верил в нас – пациентам, нашим коллегам-исследователям и врачам, которые побуждали нас продолжать“.
Теперь статья озаглавлена “Detection of S1 spike protein in CD16+ monocytes up to 245 days in SARS-CoV-2-negative post-COVID-19 vaccine syndrome (PCVS) individuals” в журнале вакцин и иммунотерапевтических средств для человека.
Описание методов работы
Несмотря на то, что во всём мире было введено более 13 миллиардов доз вакцины против SARS-CoV-2, сохраняющиеся после вакцинации симптомы, называемые постпрививочным синдромом COVID-19 (PCVS), напоминают постковидные осложнения (PASC).
Такие симптомы, как проблемы с сердцем, сосудами и неврологические нарушения, часто возникают вскоре после вакцинации и сохраняются от нескольких месяцев до нескольких лет, напоминая PASC.
Ранее мы показали, что субъединица S1 шиповидного белка SARS-CoV-2 сохраняется в CD16+ моноцитах после заражения, потенциально вызывая PASC. Одобренные вакцины (Pfizer, Moderna, Janssen, AstraZeneca) содержат синтетический S1 для выработки иммунитета, что указывает на общий механизм.
Мы предположили, что сохранение S1, полученного из вакцины, в моноцитах CD16+ поддерживает воспаление, подобное PASC, и способствует PCVS. Мы изучили 50 человек с симптомами PCVS, длящимися более 30 дней после вакцинации, и 26 бессимптомных контрольных групп, используя (1) иммунологическое профилирование на основе машинного обучения для сравнения цитокиновых сигнатур с PASC, (2) проточную цитометрию для выявления S1 в CD16 + моноцитах и (3) ЖХ-МС для подтверждения S1 для разных типов вакцин. Мы соотнесли персистенцию S1 с продолжительностью симптомов и воспалением.
Предварительная инфекция была исключена с помощью сбора анамнеза, анализов на антитела к нуклеокапсиду и T-детектирования, хотя окончательных результатов анализов нет. Предварительные результаты свидетельствуют о том, что сохранение S1 в моноцитах CD16+ и связанный с этим воспалительный процесс могут способствовать развитию PCVS. Для подтверждения причинно-следственной связи и распространённости необходимы дальнейшие исследования.
Предварительный результат: спайковый белок S1 в моноцитах CD16+ может быть обнаружен у людей с повреждением после вакцинации „пост-вакцинным синдромом“ на срок до 245 дней.
Одобренные в настоящее время вакцины, такие как BNT162b2 (Pfizer), mRNA-1273 (Moderna), Ad26.COV2.S (Janssen) и ChAdOx1 nCoV-19 (AstraZeneca), вводят синтетическую субъединицу S1 в мышечные клетки, чтобы вызвать иммунный ответ.Ссылка10
Учитывая сходство симптомов и роль S1 как в PASC, так и в механизмах действия вакцины, мы предположили, что сохранение S1, полученного из вакцины, в моноцитах CD16+ может поддерживать профиль воспалительных цитокинов, аналогичный тому, что наблюдается при PASC, тем самым способствуя PCVS у людей, не заразившихся SARS-CoV-2 ранее.
Чтобы проверить эту гипотезу, мы провели исследование с участием 50 человек с недавно возникшими симптомами PCVS, которые сохранялись более 30 дней после вакцинации (вакцинами Pfizer, Moderna, Janssen и AstraZeneca), и сравнили их с 26 вакцинированными без симптомов людьми из контрольной группы.
Мы использовали три взаимодополняющих аналитических подхода: (1) иммунное профилирование на основе машинного обучения для сравнения сигнатур цитокинов PCVS с сигнатурами PASC, (2) проточную цитометрию для выявления S1 в подмножествах моноцитов CD16+ и (3) жидкостную хроматографию — масс-спектрометрию (ЖХ-МС) для подтверждения наличия S1 и родственных пептидов в разных типах вакцин. Кроме того, мы оценили корреляции между сохранением S1, продолжительностью симптомов и воспалительными маркерами, чтобы установить потенциальную связь с клиническими результатами.
Значительной сложностью в этом исследовании было исключение предшествующей инфекции SARS-CoV-2, поскольку не существует однозначного «золотого стандарта» для подтверждения этого факта. Чтобы решить эту проблему, мы обследовали участников, используя сочетание данных анамнеза, отрицательных результатов тестов на антитела к нуклеокапсиду и анализов T-Detect (FDA EUA Adaptive Technologies), чтобы свести к минимуму вероятность предшествующего заражения.
Наши результаты дают предварительные доказательства того, что сохранение S1 в моноцитах CD16+ может способствовать PCVS, что указывает на потенциальный механизм возникновения симптомов после вакцинации. Однако мы подчёркиваем необходимость более масштабных исследований, чтобы подтвердить причинно-следственную связь и определить более широкую распространённость этих эффектов.
Исследователи под руководством Брюса К. Паттерсона обнаружили, что спайковый белок вируса S1 обнаруживается в определенных иммунных клетках, называемых моноцитами CD16+, в течение 245 дней после вакцинации.
Это открытие может предоставить возможный механизм симптомов повреждения после вакцинации — пишут авторы.
Что особенного в исследовании: у всех пациентов был отрицательный результат на Covid-19. Таким образом, исключается возможность того, что это может быть так называемый „длительный Covid“.
Эта работа немного перекликается еще с одной громкой:
В исследование были включены 50 человек с симптомами после вакцинации, которые сохранялись более 30 дней после вакцинации, а также 26 бессимптомных контрольных субъектов. Участникам были предоставлены вакцины от Pfizer, Moderna, Janssen или AstraZeneca.
Среди наиболее частых симптомов были усталость (54%), невропатия (54%), ухудшение памяти („мозговой туман“, 44%) и головная боль (46%). У лиц с симптомами белок S1, неклассические (92%) и промежуточные (67%) моноциты CD16+, был значительно повышен у лиц с симптомами. С другой стороны, это было зарегистрировано только в одном случае из контрольной группы.
Белки S1 и S2, а также измененные белки S1 были обнаружены в их иммунных клетках у пяти вакцинированных пациентов. Это говорит о том, что эти белки вакцины дольше остаются в организме.
Кроме того, исследователи обнаружили, что некоторые воспалительные вещества (цитокины) были повышены. Воспаление связано с определенными жалобами, такими как боль в груди и проблемы с нервами, тремор и усталость, шум в ушах и одышка.
Чтобы исключить заражение SARS-CoV-2, исследователи провели тесты на антитела к нуклеокапсидному белку и анализы на Т-детектирование. Но остается вероятность необнаруженных инфекций. Кроме того, исследователи ограничивают свое открытие из-за небольших выборок.
Они подчеркивают, что причинно-следственная связь между персистенцией S1, то есть тем, что спайковый белок дольше остается в организме, и пост-вакантным синдромом не доказана. Потому что спайк также был обнаружен у человека из контрольной группы. Симптомы могут быть вызваны и другими факторами, ограничивают себя ученые.
Дальнейшие результаты:
Участники были отобраны в Центре лечения хронических заболеваний, связанных с COVID-19 (CCTC), частной клинике телемедицины, с помощью форм для регистрации пациентов, в которых фиксировались стойкие симптомы после вакцинации, а также по направлениям врачей по всей территории США. Большинство участников с симптомами лечились амбулаторно; однако двое из них ненадолго обратились в отделение неотложной помощи для первичной оценки симптомов, не требующей госпитализации. Даты вакцинации и номера партий были подтверждены с помощью карт вакцинации, выданных Центром по контролю и профилактике заболеваний, что обеспечило точную регистрацию вакцинации.
Мы обследовали 50 человек (средний возраст 41,8 года, 36 женщин, 14 мужчин), у которых после вакцинации (Pfizer: 27 человек, Moderna: 15 человек, JNJ: 7 человек, AstraZeneca: 1 человек) развились симптомы, похожие на PASC. В среднем с момента последней прививки до забора крови прошло 105 дней (от 38 до 245). У контрольной группы (n = 26, средний возраст 41 год, 16 женщин, 10 мужчин) после вакцинации (в среднем через 97 дней, в диапазоне 47–162) не наблюдалось никаких симптомов ().
Преобладающими симптомами были усталость (27/50), невропатия (27/50), затуманенность сознания (22/50) и головные боли (23/50), в зависимости от типа вакцины ().
Чтобы оценить, были ли эти симптомы связаны с иммунным профилем, подобным PASC, мы провели машинное обучение на панели из 14 цитокинов / хемокинов (отобранной из 158 биомаркеров на основе предыдущих исследований PASCЦитата12 среди 50 пациентов с симптомами и 26 здоровых вакцинированных контрольных групп). Алгоритм единого классификатора классифицировал иммунный профиль группы с симптомами как PASC-подобный, хотя двойной классификатор указывал на меньшее воспаление, чем при острой SARS-CoV-2 (). Статистически значимое повышение уровня IL-4 (p = 0,020), CCL3 (p = 0,0012), CCL5 (p = 0,0067), sCD40L (p < 0,0001), IL-8 (p < 0,0208) и VEGF (p = 0,0175) у пациентов с симптомами по сравнению с контролем (). Статистически значимое снижение уровня TNF-α (p = 0,0011) и GM-CSF (p = 0,0036) (дополнительный рисунок S2). Незначительные изменения уровня цитокинов представлены на дополнительном рисунке S1.
Общий вывод работы:
Появились клинические отчёты о сохраняющихся симптомах после вакцинации, но их механистические объяснения остаются неуловимыми. Основываясь на нашем предыдущем открытии, что белок S1 сохраняется в CD16+ моноцитах при PASC (длительном COVID),Citation9 мы исследовали, не лежит ли в основе симптомов, похожих на PASC, после вакцинации одобренными вакцинами от COVID-19 (Pfizer, Moderna, Janssen, AstraZeneca) схожий воспалительный механизм. Наши результаты, свидетельствующие об изменении иммунного профиля, длительном присутствии белка S1 и конкретных симптомах, указывают на потенциальную общую патофизиологию, лежащую в основе этих эффектов.
Учитывая схожесть симптомов с PASC и отсутствие вируса, способного к репликации, Citation9 мы применили машинное обучение к 14-компонентной панели цитокинов, полученной от 50 пациентов с симптомами, и обнаружили значительное повышение уровня IL-4, CCL3, CCL5 (RANTES), sCD40L, VEGF (фактора роста эндотелия сосудов) и IL-8 (), а также значительное снижение уровня TNF-α и GM-CSF. Эти профили соответствуют характеристикам, подобным PASC, на основе одинарных и двойных классификаторов (оценка серьезности и индекс дальности перевозки) (), хотя известность IL-8 отличает эту группу от PASC.Цитирование12
Корреляционный анализ связал эти цитокины с конкретными симптомами (): IL-8 отслеживался при болях в груди, суставах и невропатии; sCD40L — при подергиваниях, треморе, усталости и тумане в мозгу; и CCL3 — при широком спектре, включая боль в груди, проблемы со зрением, сенсорную чувствительность, шум в ушах, одышку, головные боли, туман в мозге и невропатию.
Интересно, что CCL3 и CCL5 (RANTES), которые являются провоспалительными хемокинами, участвующими в привлечении моноцитов и макрофагов, взаимодействуют с рецепторами CCR5, способствуя развитию нейропатической боли, нейровоспаления и мигрени.Ссылка13 Однако сообщалось, что нейропатическая боль и воспаление, связанные с повышением уровня CCL3/CCR5, смягчаются противовоспалительным действием IL-4. Таким образом, статистически значимое повышение уровня IL-4, наблюдаемое в этом исследовании, может отражать противовоспалительную реакцию на экспрессию CCL3 и CCL5 (RANTES). Ссылка14 Известно, что IL-4 подавляет выработку TNF-α в моноцитах, что подтверждает гипотезу о том, что наблюдаемое значительное снижение уровня TNF-α было противовоспалительным противовесом.Ссылка15
Кроме того, TNF-α может вызывать апоптоз моноцитов через путь гибели TNFR1, и снижение уровня TNF-α, наблюдаемое в этом исследовании, потенциально может объяснять повышенное количество CD16+ моноцитов, наблюдаемое в течение нескольких недель и месяцев в нашей группе пациентов (). Ссылка16 GM-CSF способствует созреванию моноцитов в макрофаги и дендритные клетки. Снижение уровня GM-CSF, наблюдаемое в этом исследовании (дополнительный рисунок S2), может ограничивать этот процесс, потенциально способствуя сохранению менее дифференцированных моноцитов, таких как неклассические моноциты ().Ссылка17
Хотя уровень провоспалительного IL-2 не достиг статистической значимости (дополнительный рисунок S1), он коррелировал с невропатией, «мозговым туманом», головными болями, головокружением, одышкой, синдромом постуральной ортостатической тахикардии и тахикардией. Эти закономерности позволяют предположить, что определённые цитокины могут отражать тяжесть симптомов или нарушение регуляции иммунной системы, что даёт представление об их роли в PCVS и потенциальных терапевтических мишенях.
Чтобы изучить клеточную основу, мы исследовали обнаружение белка S1 в подгруппах моноцитов. С помощью проточной цитометрии мы обнаружили S1 в неклассических моноцитах (NCM: 11/12 пациентов) и промежуточных моноцитах (IM: 8/12) в течение 245 дней после вакцинации.
С помощью жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии мы подтвердили наличие S1, S2 и мутантных пептидов S1 во всех типах вакцин, в отличие от PASC, где был обнаружен только S1.Цитирование9 Корреляции симптомов показали, что S1 + IM ассоциирован с сенсорной гиперчувствительностью, шумом в ушах, всхлипами, тахикардией, ПОТ и головными болями; S1 + NCM — с нарушениями зрения, ПОТ, усталостью и головными болями; и S1 + классические моноциты — с нарушениями менструального цикла, сенсорной гиперчувствительностью, тахикардией, болями в суставах и головными болями.
Повышенный уровень NCM (не S1+) коррелировал с нарушениями менструального цикла, болью в груди, тремором, повышенной чувствительностью к прикосновениям, шумом в ушах, одышкой, тахикардией, синдромом постуральной ортостатической тахикардии, усталостью и невропатией, что указывает на более широкую активацию моноцитов, помимо S1 ().
Примечательно, что недавнее исследование PCVS также показало значительно повышенный уровень NCM.Ссылка18 Эти закономерности указывают на то, что определённые популяции моноцитов могут влиять на тяжесть симптомов, потенциально через воспалительные процессы, связанные с иммунными реакциями на COVID.
С точки зрения механизма, сохранение S1 в моноцитах CD16+ может вызывать воспаление через сосудистые пути. Неклассические моноциты (NCM), которые экспрессируют CX3CR1, связываются с фракталином, повышающимся под действием IL-1, IFN-γ и TNF-α, на эндотелиальных клетках, повышая выживаемость за счёт белка BCL2 и мобилизуясь во время стресса или физической нагрузки.Ссылки19-25 Это взаимодействие, связанное с атеросклерозом и васкулопатиями,ссылки26,ссылки27 может вызвать эндотелиалит, активируя тромбоциты через гликопротеин 1b-IX-V и фактор фон Виллебранда.Цитата28,Цитата29
Активированные тромбоциты затем высвобождают sCD40L и CCL5,цитата30 рекрутируют моноциты и нейтрофилы, что согласуется с такими симптомами, как усталость, тремор и боль в груди.
Повышенный уровень VEGF, связанный с шумом в ушах, одышкой и головными болями, может ухудшать проницаемость микрососудов и приводить к тромбозу, что отражает сообщения о поствакцинальной коагулопатии.Цитата31 Такие методы лечения, как антагонисты CCR5 или статины, которые снижают набор моноцитов и экспрессию фракталкинов, могут быть многообещающими, как показано в PASC, хотя для подтверждения их эффективности необходимы рандомизированные клинические испытания.Цитата32-34
Эти результаты позволяют предположить, что S1, обнаруженный в моноцитах CD16+, в сочетании с профилем цитокинов, похожим на PASC, может способствовать возникновению стойких симптомов после вакцинации.
Интересно, что аналогичный механизм нерепликативной активации моноцитов был описан in vitro при использовании инактивированных нагреванием Borrelia burgdorferi, возбудителя болезни Лайма.Ссылка35,Ссылка36
Об этом тоже уже писалось:
Уникальное присутствие S2 и мутантных S1-пептидов вызывает вопросы о специфичных для вакцины эффектах, хотя их клиническая роль остается неясной и требует дальнейшего изучения. Корреляции, зависящие от симптомов, подтверждают эту гипотезу, однако причинно-следственная связь не установлена, поскольку у одного пациента не было S1 при NCM, а у четырёх пациентов не было S1 при ИМ, и связи различались в зависимости от подгрупп. Кроме того, обнаружение S1 у одного контрольного пациента позволяет предположить, что он может быть характерен не только для симптоматической ПКВС, что требует дальнейшего изучения его патогенной роли ().
К ограничениям относится невозможность окончательно исключить предыдущую инфекцию SARS-CoV-2, несмотря на отрицательный результат ПЦР, отсутствие антител к нуклеокапсиду и скрининг T-Detect, что позволяет предположить, что некоторые случаи S1 могли быть вызваны невыявленным заражением. Мы провели U-тест Манна — Уитни для сравнения уровней цитокинов в двух группах: у людей, обследованных до 120-го дня, и у людей, обследованных через 120 дней или позже (). Этот непараметрический тест был выбран для оценки различий в распределении без предположения о нормальном распределении.
Результаты показали, что ни один из биомаркеров не продемонстрировал статистически значимых различий между двумя группами, поскольку все значения p превышают 0,05. Хотя эти результаты не исключают полностью такие факторы, как субклиническая инфекция или невыявленное воздействие SARS-CoV-2 после вакцинации, они указывают на то, что уровни цитокинов оставались относительно стабильными в оба периода времени, без явных признаков изменения распределения маркеров воспаления с течением времени. Для выявления возможных незначительных изменений могут потребоваться дальнейшие исследования с большим количеством участников и подгрупп.
Небольшая выборка (n = 50, анализ S1 у 12 пациентов) и широкий временной диапазон (38–245 дней) ограничивают надёжность ассоциативных связей, а отсутствие лонгитюдных данных затрудняет динамическое наблюдение. Симптомы также могут быть вызваны другими факторами, и распространённость нельзя определить.
Для подтверждения этих связей, изучения влияния S2/мутантного S1 и тестирования вмешательств, нацеленных на пути CCR5 или VEGF, необходимы более масштабные лонгитюдные исследования с расширенным скринингом на инфекции.
Можно с полным основанием задаться вопросом, что такого запретного в этом исследовании, что ученые столкнулись с угрозами смерти…
Источники:
