Министерство здравоохранения и социальных служб США (HHS) и Фонд Билла и Мелинды Гейтс помогли финансировать исследовательскую группу США-Ухань, которая разработала аденовирус, предназначенный для доставки аппарата редактирования ДНК в кровообразующие стволовые клетки человека, согласно исследованию, опубликованному 1 июля в журнале Molecular Therapy.
Molecular Therapy
Заявленной целью исследования было генетическая модификация человеческих стволовых клеток для устойчивости к ВИЧ-инфекции.
Здесь мы представляем стратегию генной терапии ВИЧ путем in vivo прецизионного редактирования генов в гемопоэтических стволовых клетках (ГСК). Мы успешно создали панель аденовирусных векторов, экспрессирующих универсальные базовые редакторы (HDAd-BE), нацеленные на ген CCR5. В клеточной линии, восприимчивой к ВИЧ, трансдукция вектором HDAd-BE привела к почти полному редактированию целевого участка, нокауту CCR5 и подавлению ВИЧ-инфекции.
В обогащенных гемопоэтическими стволовыми клетками человеческих CD34+ клетках от мобилизованных доноров или из пуповинной крови мы измерили эффективность прецизионного редактирования оснований после трансдукции и селекции с помощью HDAd-BE. После in vitro дифференцировки Т-клеток и заражения ВИЧ мы продемонстрировали, что титры генома ВИЧ были значительно ниже при прецизионном редактировании оснований CCR5.
Важно отметить, что в гуманизированной мышиной модели in vivo трансдукция вектором HDAd-BE с последующей селекцией привела к редактированию примерно 50 % оснований в CCR5 в мононуклеарных клетках костного мозга, что обеспечило снижение титров ВИЧ в плазме крови примерно в 12 раз по сравнению с контрольными животными после заражения ВИЧ. Не наблюдалось значительного нецелевого редактирования и побочных эффектов, связанных с лечением. Воздействие на гемопоэтические стволовые клетки позволяет точно сконструировать клетки, устойчивые к ВИЧ in vivo наша стратегия представляет собой эффективный, надежный и доступный подход к функциональному излечению от ВИЧ-инфекции.
Однако такие эксперименты поднимают более широкие вопросы о рисках финансирования предполагаемых вирусных систем, предназначенных для постоянного изменения человеческого организма.
Исследование финансировалось за счёт нескольких грантов Национальных институтов здравоохранения (NIH) в рамках HHS, грантов Фонда Билла и Мелинды Гейтс и поддержки биотехнологической компании Ensoma Bio.
Авторы сотрудничают с Университетом Вашингтона, Онкологическим центром Фреда Хатчинсона и Государственной ключевой лабораторией вирусологии и биобезопасности при Уханском институте вирусологии Китайской академии наук.
В исследовании отмечается поддержка грантов NIH R01HL128288, R01AI174304, K08AI183990 и R01HL141781, а также грантов INV-017692 и INV-038139 от Фонда Билла и Мелинды Гейтс.
Дополнительную поддержку оказали Китайский проект по профилактике и контролю новых и крупных инфекционных заболеваний — Национальный научно-технический крупный проект и Ensoma Bio.
Снова CRISPR
Согласно статье, учёные утверждают, что модифицировали модифицированные хелпер-зависимые аденовирусные векторы (HDAd) для передачи базовых редакторов, основанных на CRISPR, запрограммированных на изменение гена CCR5 человека.
Вместо того чтобы редактировать клетки вне организма, исследователи утверждают, что они разработали аденовирус так, чтобы он доставлял аппарат редактирования генов непосредственно в кровообразующие стволовые клетки внутри живого субъекта.
Гемопоэтические стволовые клетки постоянно производят новые кровяные и иммунные клетки на протяжении всей жизни человека.
Изменяя ДНК этих стволовых клеток, исследователи утверждают, что стремились создать постоянный запас иммунных клеток, лишённых функционального рецептора CCR5, который, как говорят, ВИЧ часто использует для заражения клеток.
В исследовании утверждается, что искусственный аденовирус вызвал «почти полное редактирование целевых сайтов» в клеточной линии, допускающей ВИЧ.
- Исследователи также сообщили об эффективном редактировании кровеобразующих стволовых клеток человека CD34+, полученных от мобилизованных доноров и пуповинной крови.
- Эксперименты выходили за рамки лабораторных клеточных культур.
- Исследователи ввели инженерный аденовирусный вектор в гуманизированных мышей, обогащали якобы генетически модифицированные клетки, а затем подвергли животных воздействию ВИЧ.
Согласно статье, примерно 50% целевых участков CCR5 были отредактированы в клетках костного мозга, а у обработанных животных титры плазмы ВИЧ были примерно в 12 раз ниже, чем у нелеченных контролей после вызова ВИЧ.
В статье описывается эта работа как часть более широкой работы по переходу редактирования генов человека от процедур ex vivo — когда клетки удаляются, генетически модифицируются и повторно инфузируются — к редактированию in vivo, проводимому непосредственно внутри организма с использованием предполагаемых систем доставки вирусов.
Исследователи пишут, что аденовирусные векторы, зависящие от хелпера, могут нести крупные генетические нагрузки, производиться с относительно низкой стоимостью и адаптироваться для доставки различных систем редактирования генома в гемопоэтические стволовые клетки
К чему такие эксперименты могут привести
Средства американских налогоплательщиков и финансирование Фонда Гейтса помогли финансировать сотрудничество США и Уханя, которое создало вирус для переноса якобы человеческого оборудования для редактирования ДНК в живые клетки.
Исследование демонстрирует продолжающиеся государственные инвестиции в предполагаемые системы распространения вирусов, предназначенные для постоянных изменений внутри организма.
После участия Конгресса, Белого дома, Министерства энергетики, ФБР, ЦРУ и Федеральной разведывательной службы Германии (BND) многие признали, что пандемия COVID-19 «вероятно» стала результатом лабораторного инцидента с участием модифицированных патогенов.
Но эксперименты продолжаются.
Статьи по теме
- «Черный ящик» развития человека: китайские ученые повторили этапы гаструляции
- Мутантный устойчивый к лекарствам вариант Эболы был создан незадолго до вспышки в Африке
- Журнал ‘Scientific Reports’: ПЦР-тесты на Эболу дают противоречивые результаты
- Эбола и очередные параллели с программами реагирования США
- Новые странные «совпадения» вспышки Эболы и мРНК инъекции от неё
- Теперь и от гриппа: новая мРНК-1010 от Moderna
- Укус клеща, синдром альфа-гал и спайковый белок: какая связь
- Первая ИИ-вакцина от коронавирусов и 148 нежелательных событий среди 39 участников
